| |
定量PCR诊断卡氏肺孢子虫病特异性高 |
|
| 疾病大全 --- 传染科 |
据第8届国际逆转录病毒和机会性感染会议文献载，美国Larson等的研究表明，定量PCR在卡氏肺孢子虫肺炎诊断中有一定作用，可以显著提高诊断的阳性预测值。
卡氏肺孢子虫(Pc)是免疫抑制病人肺炎的重要病因。诊断卡氏肺孢子虫肺炎的金标准是呼吸道标本如诱导祛痰(IS)或支气管肺泡灌洗液(BAL)显微镜检查。分子生物学方法(例如PCR)亦被用于IS、BAL和口腔洗漱液(OW)的检查。由于分子生物学方法敏感性高，Pc DNA曾在未患卡氏肺孢子虫肺炎的病人中检测出(假阳性)，这降低了该方法的临床特异性和阳性预测值。Larson等推测，定量分析或许有助于鉴别假阳性和真阳性Pc PCR检测结果，因为假阳性(定殖或携带)的拷贝数有可能比真阳性低。
研究者建立了一种临床诊断Pc的快速、定量的实时PCR技术，该方法所需时间包括DNA提取在内不超过4小时。他们改进了以Pc多拷贝MSG基因作为目标的PCR技术，并且设计了荧光共振能转换(fluoresence resonance energy transfer，FRET)检测探针。将克隆的目标序列连续10倍稀释，作为定量标准。用另一个FRET探针检测模拟物作为内对照。病人的标本分成3份。研究者对以前做过PCR检测的56例病人的128份呼吸道标本(30份BAL，19份 IS和79份OW)进行了回顾性盲法研究。因为目的是研究定量分析的实用性，研究者故意选择假阳性率较高的标本(根据以前的PCR结果)，并与随机标本比较。检查者对所有资料一无所知。所有标本至少有一张阳性涂片(IS或BAL)作为诊断依据。
研究者提示，在评估下述结果时，应考虑选择样本的偏向(即特异性和阳性预测值比随机样本低)。结果显示，假阳性标本拷贝数有偏低倾向，这种倾向存在于所有各类样本。IS和BAL标本检测的敏感性为1.00，特异性为0.65，阳性预测值为0.62，阴性预测值为1.00。如果将10个拷贝/试管作为诊断标准，阳性预测值升至0.89而阴性预测值降至0.94。对于OW＃1标本(即连续取2份口腔洗漱液标本中的第一份，共50份)，敏感性为0.94，特异性为0.90，阳性预测值为0.85，阴性预测值为0.97。仍将10个拷贝/试管作为诊断标准，阳性预测值升至1.00而阴性预测值降至0.91。
Larson等指出，还需做进一步的研究才能得到肯定结论。（中国医学网）
|
| 页面功能：【发表评论】【告诉好友】【打印此文】【收藏此文】【关闭窗口】 |
| |
|
| |
|
|
|
